Автор работы: Пользователь скрыл имя, 09 Декабря 2010 в 19:11, доклад
Материалы, методика, интерпретация результатов биохимии
Биохимическое
исследование крови.
Материалы, методика,
интерпретация результатов
биохимии
Исследуемый
материал: сыворотка,
реже плазма.
Взятие: Натощак, обязательно
перед проведением
Сдавливание сосуда
во время взятия крови должно быть
минимальным.
Несколько слов о
пункции яремной вены. Часто, в
практике, случается, что, повозившись
пятнадцать минут с венами полумертвого
животного, врачи отчаиваются. СДАВАТЬСЯ
ВСЕГДА РАНО!!! Один из чудеснейших способов
взять кровь, даже при коллапсе, -
венепункция ярёмной вены. Особенно
прекрасно работает у «никаких» котов
с уремией, когда они уже не могут сопротивляться.
Важное условие – шерсть в месте пункции
лучше сбрить лезвием (лучше видно). Положение
животного на боку. Откидываем назад голову
(ассистент). Нажимаем указательным пальцем
в яремный желоб, небольшой массаж, и …
видим прекрасную, очаровательную венку.
Продолжая прижимать вену, берем кровь
шприцом 2-5 мл с иглой 0,7-0,8. Особенно не
любят подобные процедуры владельцы животных
и упертые безграмотные врачи. Не устаю
повторять: сотни раз брал кровь (и
вводил лекарства) через ярёмную вену.
ОСЛОЖНЕНИЙ НЕ БЫЛО!!!
Главное, касаемо, в
том числе, и пункции мочевого пузыря:
стоит ли пренебрегать лёгким и удобным
для всех методом, если никогда не делал
его, или боишься? Каждый выбирает для
себя.
Хранение: Сыворотка
или плазма должны быть отделены как можно
быстрее. Если есть возможность, отцентрифугируйте
на месте. Хранится материал в зависимости
от требуемых для исследования показателей
от 30 минут (при комн. температуре) до нескольких
недель в замороженном виде (сыворотка
или плазма, размораживать пробу можно
только один раз).
Доставка: Пробирки
должны быть подписаны. Доставить кровь
следует в кротчайшие сроки по возможности
в сумке-холодильнике. НЕ ТРЯСТИ!
НЕЛЬЗЯ
доставлять кровь
в шприце.
Факторы,
влияющие на результаты:
- при долгом сдавливании
сосуда повышаются при
- плазму нельзя
использовать для определения
калия, натрия, кальция, фосфора
и т.д.,
- следует учитывать,
что концентрация некоторых
Концентрация в
сыворотке больше чем в плазме:
альбумин, ЩФ, глюкоза, мочевая кислота,
натрий, ОБ, ТГ, амилаза
Концентрация в
сыворотке равна плазме:
АЛТ, билирубин, кальций, КФК, мочевина
Концентрация в
сыворотке меньше чем в плазме:
АСТ, калий, ЛДГ, фосфор
- гемолизированная
сыворотка и плазма не пригодна для определения
ЛДГ, Железа, АСТ, АЛТ, калия, магния, креатинина,
билирубина и др.
- при комнатной
температуре через 10 минут отмечается
тенденция к снижению
- высокие концентрации
билирубина, липемия и мутность проб завышают
значения холестерина,
- билирубин всех
фракций снижается на 30-50%, если
сыворотка или плазма
- физические нагрузки,
голодание, ожирение, прием пищи,
травмы, операции, внутримышечные инъекции
вызывают повышение ряд
следует учитывать,
что у молодых животных активность
ЛДГ, ЩФ, амилазы выше, чем у взрослых.
Ферменты.
Ферменты – основные
биологические катализаторы, т.е. вещества
природного происхождения, ускоряющие
химические реакции. Также, ферменты принимают
участие в регуляции многих метаболических
процессов, обеспечивая тем самым
соответствие обмена веществ изменённым
условиям. Почти все ферменты являются
белками. В зависимости от реакционной
и субстратной специфичности, различают
шесть основных классов ферментов
(оксиредуктазы, трансферазы, гидролазы,
лиазы, изомеразы и лигазы). Всего, на настоящий
момент, известно более 2000 ферментов.
Каталитическое действие
фермента, т.е. его активность, определяют
в стандартных условиях по увеличению
скорости каталитической реакции по
сравнению с некаталитической. Скорость
реакции обычно указывают как изменение
концентрации субстрата или продукта
за единицу времени (ммоль/л в секунду).
Другой единицей активности является
Международная единица (Ед.) – количество
фермента, превращающего 1 мкмоль субстрата
в 1 минуту.
Для клиники основное
значение имеют следующие ферменты:
Аспартатаминотрасфераза
(АСТ, АсАТ)
Внутриклеточный фермент,
участвующий в обмене аминокислот.
В больших концентрациях
Референтные интервалы:
для собак – 11 – 42
Ед.;
для кошек – 9 – 29
Ед.
для лошадей – 130
– 300 Ед.
Повышено: Некроз клеток
печени любой этиологии, острые и
хронические гепатиты, некроз сердечной
мышцы, некроз или травма скелетных
мышц, жировая дистрофия печени,
поражение тканей мозга, почек; применение
антикоагулянтов, витамина С
Понижено: Диагностического
значения не имеет (редко при недостатке
пиридоксина (Витамина В6).
АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА
(АЛТ, АлАТ)
Внутриклеточный фермент,
участвующий в обмене аминокислот.
В больших концентрациях
Референтные интервалы:
для собак – 9 – 52
Ед.;
для кошек – 19 – 79
Ед.
для лошадей – 2,7
– 20,0 ЕД;
Повышено: Некроз клеток,
острые и хронические гепатиты, холангит,
жировая дистрофия печени, опухоли
печени, применение антикоагулянтов
Понижено: Диагностического
значения не имеет
Креатинфосфокиназа
(КФК, КК)
КФК состоит из
трёх изоферментов, состоящих из двух
субъединиц, М и В. Скелетная мускулатура
представлена изоферментом ММ (КФК-ММ),
мозг – изоферментом ВВ (КФК-ВВ), миокард
содержит около 40% изофермента МВ (КФК-МВ).
Референтные интервалы:
для собак – 32
– 157 Ед;
для кошек – 150 –
798 Ед.
для лошадей –
50 – 300 Ед.
у молодняка в
период роста активность ЛДГ увеличивается
в 2 – 3 раза.
Повышено: Инфаркт
миокарда (2-24 ч; высокоспецифична КФК-МВ).
Травмы, операции, миокардит, мышечные
дистрофии, полимиозит, судороги, инфекции,
эмболии, тяжелая физическая нагрузка,
повреждение тканей мозга, кровоизлияние
в мозг, наркоз, отравление (в т.ч. снотворными),
кома, синдром Рейе. Незначительное увеличение
при застойной сердечной недостаточности,
тахикардии, артритах.
Понижено: Диагностического
значения не имеет.
Гамма-глутамилтрансфераза
(ГГТ)
ГГТ присутствует в
печени, почках, поджелудочной железе.
Тест крайне чувствителен в отношении
заболеваний печени. Установление высокого
значения ГГТ используется для подтверждения
печеночного происхождения
Референтные интервалы:
для собак – 1
– 10 Ед.;
для кошек – 1 – 10
Ед.
для лошадей – 1 –
20 Ед.
Повышено: Гепатит,
холестаз, опухоли и цирроз печени, поджелудочной
железы, постинфарктный период;
Понижено: Диагностического
значения не имеет.
Лактатдегидрогеназа
(ЛДГ)
ЛДГ – фермент, катализирующий
внутреннюю конверсию лактата и пирувата
в присутствии НАД/НАДН. Широко распространен
в клетках и жидких средах организма. Повышается
при разрушении тканей (искусственно завышается
при гемолизе эритроцитов при неправильном
взятии и хранении крови). Представлен
пятью изоферментами (ЛДГ1 – ЛДГ5)
Референтные интервалы:
для взрослых собак
– 23 – 164 Ед.;
для взрослых кошек
– 55 – 155 Ед.
для взрослых лошадей
– 100 – 400 Ед.
у молодняка в
период роста активность ЛДГ увеличивается
в 2 – 3 раза.
Повышено:
Повреждение ткани миокарда (2 – 7 сутки
после развития инфаркта миокарда), лейкозы,
некротические процессы, опухоли, гепатиты,
панкреатиты, нефриты, мышечные дистрофии,
повреждения скелетной мускулатуры, гемолитическая
анемия, недостаточность кровообращения,
лептоспироз, инфекционный перитонит
кошек.
Понижено: Диагностического
значения не имеет
Холинэстераза (ХЭ)
ХЭ содержится преимущественно
в сыворотке крови, печени, поджелудочной
железе. ХЭ плазмы крови - внеклеточный
фермент гликопротеиновой природы,
образующийся в клетках паренхимы печени.
Референтные интервалы:
собаки - от 2200 Е/л
кошки – от 2000 Е/л
Повышено: Диагностического
значения не имеет.
Понижено: Подострые
и хронические заболевания и поражения
печени (в связи с нарушением синтеза ХЭ
гепатоцитами), отравления фосфорорганическими
соединениями.
АМИЛАЗА (ДИАСТАЗА)
Амилаза гидролизирует
сложные углеводы. Альфа-амилаза сыворотки
происходит первично из поджелудочной
железы (панкреатическая) и слюнных желез,
активность фермента возрастает при
воспалении или обструкции. Некоторую
амилазную активность имеют и другие органы
– тонкий и толстый кишечник, скелетная
мускулатура, яичники. У лошадей амилаза
представлена, в основном, бета – фракцией.
Референтные интервалы:
для собак (альфа-амилаза)
– 685 - 2155 Ед;
для кошек (альфа-амилаза)
– 580 - 1720 Ед.
для лошадей (бета-амилаза)
– 4,9 - 16,5 Ед.
Повышено: Панкреатит,
паротит, почечная недостаточность (острая
и хроническая), отравления, сахарный
диабет, острый гепатит, первичный биллиарный
цирроз печени, заворот желудка и кишечника,
перитонит, нарушение электролитного
обмена.
Понижено: Некроз поджелудочной
железы, тиреотоксикоз, отравление мышьяком,
барбитуратами, тетрахлорметаном;
применение антикоагулянтов.
Фосфатаза
щелочная (ЩФ)
Щелочная фосфатаза
содержится в печени, костях, кишечнике
и плаценте. Для дифференциации активности
ЩФ (печень или кости) используется
определение ГГТ (увеличено при
заболеваниях печени, и без изменений
при заболеваниях костей).
Референтные интервалы:
для взрослых собак
– 18 – 70 Ед;
для взрослых кошек
– 39 – 55 Ед.
для взрослых лошадей
– 70 – 250 Ед
у молодняка в
период роста активность щелочной фосфатазы
увеличивается в несколько раз
и не является информативным показателем.
Повышено: Заживление
переломов, остеомаляция, опухоли костей,
холангит, синдром Кушинга, обтурация
желчных протоков, опухоли желчного пузыря;
абсцесс, цирроз, рак печени, гепатит, бактериальные
инфекции ЖКТ, жирный корм, беременность.
Понижено: Гипотиреоз,
анемия, гиповитаминоз С, применение кортикостероидов.