Шпаргалка по "Микробиологии"

Метод серийных разведений на жидкой питательной среде: при определении  чувствительности к антибиотикам для  основной массы антибиотиков используют МПБ или бульон на переваре Хоттингера. Агаровые ил бульонный культуры микроорганизмов предварительно разводят физиологическим раствором до концентрации клеток 5 * 10⁶/мл.

Метод серийных разведений на плотной  питательной среде: при определении  чувствительности к антибиотикам для  основной массы антибиотиков используют МПБ или бульон на переваре Хоттингера с содержанием аминного азота. Приготовленный основной раствор антибиотиков разводят в плотной питательной среде. Для этого к расплавленному и  охлажденному до 55 градусов агара, разлитому в широкие пробирки по 18 мл, добавляют по 2 мл соответствующего разведения определенного антибиотика. Тщательно перемешивают и переливают в стерильную чашку Петри. После застывания агара чашки Петри делят на сектора, каждый из которых засевают исследуемой культурой. Рпосев делают бактериологической петлей. Чашки помещают в термостат при температуре 37 градусов на 20 – 24 ч. Наименьшую концентрацию антибиотика, при которой наблюдают полную задержку роста бактерий на агаре или роста единичных колоний , принимают за МПК препарата. Если на всех чашках отмечают рост культуры – микроорганизм устойчив ко всем концентрациям антибиотика.

22. Экология микроорганизмов (распространение в воде, воздухе, почве).

Благодаря разнообразию механизмов утилизации источников питания и энергии, а  также выраженной адаптации к  внешним воздействиям, микроорганизмы могут обитать там, где другие формы жизни не выживают. Естественные среды обитания большей части  организмов – вода, почва и воздух. Число микроорганизмов, обитающих  на растениях и в организмах животных, значительно меньше. Широкое распространение  микроорганизмов связано с легкостью  их распространения по воздуху и  воде; в частности поверхность  и дно пресноводных и соленых  водоемов, а также несколько сантиметров  верхнего слоя почвы изобилуют микроорганизмами, разрушающими органические вещества. Меньшее количество микроорганизмов  колонизирует поверхность и некоторые  внутренние полости животных (например, ЖКТ, верхние отделы дыхательных  путей) и растений. В зонах обитания микроорганизмы образуют микроценозы  – сообщества со специфическими и  часто необычными взаимоотношениями. Каждое микробное сообщество в конкретном ценозе образуют специфичные аутохтонные  микроорганизмы (греч. аutos - свой, chthon - страна; буквально – чужестранец) обычно в них встречающиеся. В природных биоценозах (почва, вода, воздух) выживают и размножаются лишь те микроорганизмы, которым благоприятствует окружающая среда; их рост прекращается, как только меняются условия окружающей среды. В природе большую часть бактерий поедают хищные простейшие, но часть клеток каждого вида выживает; при наступлении благоприятных условий они дают начало новым клонам микроорганизмов.

23. Микрофлора тела животных. Дисбактериоз и методы его коррекции. Гнобиотики. Пробиотики ветеринарного  назначения.

Дисбактериоз (дисбиоз) – это любые количественные или качественные изменения типичной для данного биотопа нормальной микрофлоры человека, возникающие в результате воздействия на макро– или микроорганизм различных неблагоприятных факторов.

Микробиологическими показателями дисбактериоза  служат:

1) снижение численности одного или нескольких постоянных видов;

2) потеря бактериями тех или иных признаков или приобретение новых;

3) повышение численности транзиторных видов;

4) появление новых, несвойственных данному биотопу видов;

5) ослабление антагонистической активности нормальной микрофлоры.

Причинами развития дисбактериоза  могут быть:

1) антибиотико– и химиотерапия;

2) тяжелые инфекции;

3) тяжелые соматические заболевания;

4) гормонотерапия;

5) лучевые воздействия;

6) токсические факторы;

7) дефицит витаминов.

Дисбактериоз различных биотопов имеет различные клинические  проявления. Дисбактериоз кишечника  может проявляться в виде диареи, неспецифического колита, дуоденита, гастроэнтерита, хронических запоров. Дисбактериоз органов дыхания протекает в  форме бронхитов, бронхиолитов, хронических  заболеваний легких. Основными проявлениями дисбиоза ротовой полости являются гингивиты, стоматит, кариес. Дисбактериоз половой системы у женщин протекает  как вагиноз.

В зависимости от выраженности этих проявлений различают несколько  фаз дисбактериоза:

1) компенсированную, когда дисбактериоз не сопровождается какими-либо клиническими проявлениями;

2) субкомпенсированную, когда в результате дисбаланса нормальной микрофлоры возникают локальные воспалительные изменения;

3) декомпенсированную, при которой происходит генерализация процесса с возникновением метастатических воспалительных очагов.

Лабораторная диагностика дисбактериоза

Основной метод – бактериологическое исследование. При этом в оценке его результатов превалируют  количественные показатели. Проводится не видовая идентификация, а только до рода.

Дополнительный метод – хроматография  спектра жирных кислот в исследуемом  материале. Каждому роду соответствует  свой спектр жирных кислот.

Коррекция дисбактериоза:

1) устранение причины, вызвавшей дисбаланс нормальной микрофлоры;

2) использование эубиотиков и пробиотиков.

Эубиотики – это препараты, содержащие живые бактерициногенные штаммы нормальной микрофлоры (колибактерин, бифидумбактерин, бификол и др.).

Пробиотики – это вещества немикробного происхождения и продукты питания, содержащие добавки, стимулирующие  собственную нормальную микрофлору. Стимулирующие вещества – олигосахариды, гидролизат казеина, муцин, молочная сыворотка, лактоферин, пищевые волокна.

24. Влияние физических факторов на микроорганизмы.

Микроорганизмы находятся во внешней  среде, подвергаясь воздействиям факторов. Самым ощутимым фактором, который  воздействует на микроорганизмы является температура. Она может действовать на микроорганизмы по-разному, в зависимости от ее величины. Микроорганизмы по-разному относятся к высоким и низким температурам. Различают: оптимальную, при которой микроорганизмы наиболее быстро развиваются; максимальную и минимальную температуры – границы за пределами которых организм погибает.

Микроорганизмы предпочитают среднюю  температуру (+20 - +40) – мезофиллы, т. е. микроорганизмы окружающей нас среды, вызывают брожение, в том числе  относительные возбудители болезни  животных. Высокие температуры, в  качестве оптимальной предпочитают термофилы – выше +40 – микроорганизмы почв с теплым климатом, горячих  источников, а также ЖКТ животных и птиц. Многие из термофильных микроорганизмов способны создавать для себя условия с высокой температурой. Холодный климат – психрофилы – микроорганизмы  холодильных камер, которые могут заселять сетку кондиционера. Микроорганизмы холодных морей, океанов, растений, которые они поражают. Температура - +7, -1, -7 – некоторые микроорганизмы развиваются как психрофильных, мезофильных. При высокой температуре происходит коагуляция белка, иноктивация ферментов – приводит к гибели организма. Низкие температуры консервированных микроорганизмов, приводят организм в стадию анабиоза. Определенная часть микроорганизмов погибает, с образованием кристалликов льда.

Солнечный свет и другие световые излучения. Микроорганизмы являются наиболее чувствительным от прямого воздействия солнечных излучений. Ультрафиолетовые лучи –кратковолновое излучение – наиболее губительны. Ультрафиолетовые лучи используют в лабораторной практике. Находится в помещении при их работе нельзя. Ультразвук – колебание упругой среды, высокочастотной, который приводит к разнице в давлении внутри клетки и во внешней среде – клетка разрушается. Ультразвуковые колебания стоят за пределами слышимости человеческого уха. Электромагнитное поле – не оказывает воздействия на рост микроорганизмов, за исключением, которые содержат много железа. Изменение температуры, диссоциация ионов , невесомость. Различные виды излучения: рентгеновское и другие, могут вызывать гибель микроорганизмов.

25. Влияние химических факторов на микроорганизмы.

Способность ряда химических веществ  подавлять жизнедеятельность микроорганизмов  зависит от концентрации химических веществ и времени контакта с  микробом. Дезинфектанты и антисептики  дают неспецифический микробицидный  эффект. Бактерицидным действием  обладают химические вещества различных  групп: кислоты, щелочи, спирты, поверхностно-активные вещества, фенолы и их производные, соли тяжелых металлов, окислители, группа формальдегида, газообразные вещества и др. Большое разнообразие природы  и химической структуры указанных  веществ обусловливает и различные  механизмы их бактерицидного действия на микробную клетку.

Бактерицидное действие кислот зависит  от их электролитической диссоциации, то есть концентрации Н-ионов в растворах  и их окисляющего действия. Чувствительность к кислотам различна у разных микроорганизмов. Так, показано, что если оптимальная  концентрация Н-ионов для CI. botulinum соответствует 7,6, то при доведении рН до 4,6 наступает  гибель этих бактерий. Самое низкое значение рН, при которой еще наблюдался рост, -- это 4,8; при рН 4,7 могут прорастать только споры, а при рН 4,6 наступает прекращение роста вообще.

Бактерицидная активность едких щелочей  зависит от степени диссоциации  и концентрации ОН-ионов. Наибольшей бактерицидной силой обладает КОН, затем следуют NaOH и другие щелочи. Так же как и в отношении кислот, бактерии обладают определенной щелочной устойчивостью.

Спирты. При разведении спирт приобретает бактерицидные свойства, причем наибольшей бактерицидностью обладает 70 %-ный спирт. Более высокие концентрации свертывают белок, который выпадает на поверхности бактерий и уменьшает проникновение спирта в глубь клетки. Бактерицидность спиртов увеличивается с возрастанием молекулярной массы в ряду: метиловый -- этиловый -- пропиловый -- бутиловый -- амиловый и т.д.

Поверхностно-активные вещества -- это жирные кислоты, мыла, детергенты. Все они изменяют энергетические соотношения на поверхности раздела, устремляются к поверхности раздела клетки и повреждают клеточную оболочку, не затрагивая внутренних структур клетки.

Красители. К красителям с бактерицидными свойствами относят бриллиантовый зеленый, этакридин, флавакридин и др. В основе их действия лежит выраженное сродство с фосфорнокислыми группами нук-леопротеидов.

Фенолы и их производные первоначально  повреждают клеточную стенку, а затем  и белки бактериальной клетки.

Соли тяжелых металлов (свинец, медь, цинк, серебро, ртуть) и их соли оказывают коагулирующее влияние  на цитоплазму либо на ферментные системы, связывая их сульфгидрильные группы.

Окислители -- хлор, йод, марганцовокислый калий, перекись водорода и др., окисляют существенные компоненты цитоплазмы (сульфгидрильные группы активных белков, фенольные, тиоэтильные, индольные, аминные).

Формальдегид также денатурирует белки, он убивает как вегетативные формы, так и споры. Его применяют  для обезвреживания дифтерийного и  столбнячного токсинов, благодаря чему они превращаются в анатоксины.

Химические вещества (хлор, формальдегид, щелочи, кислоты, фенол и др.) используются в практике в качестве дезинфицирующих  веществ. Дезинфекция заключается  в уничтожении патогенных микробов. К ней обычно прибегают для  обеззараживания помещений, скотных  дворов, территории.

Химиотерапевтические средства проявляют  избирательное противомикробное действие.

По механизму действия противомикробные вещества разделяются на:

а) деполимеризующие пептидогликан  клеточной стенки,

б) повышающие проницаемость клеточной  мембраны,

в) блокирующие те или иные биохимические  реакции,

г) денатурирующие ферменты,

д) окисляющие метаболиты и ферменты микроорганизмов,

е) растворяющие липопротеиновые структуры,

ж) повреждающие генетический аппарат  или блокирующие его функции.

У микроорганизмов химической деструкции, прежде всего, подвергаются белки и  липиды цитоплазматической мембраны, белковые молекулы жгутиков, фимбрий, секс-пили, порины клеточной стенки грамположительных бактерий, связывающие белки периплазмы, протеиновые капсулы, экзотоксины, ферменты-токсины и ферменты питания. Деструкция гетерогенных полимеров (белки, полиэфиры и др.) происходит как при действии окислителей, так и при действии гидролизующих и детергентных антисептиков (кислоты, щелочи, соли двух- и поливалентных металлов и др.).

26. Влияние биологических факторов на микроорганизмы.

К биологическим средствам могут  быть отнесены препараты, содержащие живых  особей - бактериофагов и бактерий, обладающих выраженной конкурентной активностью  по отношению к патогенным и условно-патогенным для человека и животных видам  микробов. Они вводятся в организм в жизнеспособном состоянии. Фаги и  антагонисты оказывают прямое повреждающее действие на патогенных и условно-патогенных микробов; изготовленные из них лекарственные  препараты предназначены для  местного применения, для них характерна специфичность действия на микроорганизмы и безвредность для пациента; целью  их внесения в организм человека и  животных является лечение или профилактика инфекционных заболеваний. По механизму  действия они близки к химическим антисептикам.

Необходимо также помнить и  о молочнокислых бактериях, которые  вызывают процесс молочнокислого брожения. Некоторые молочнокислые бактерии способны синтезировать антибиотики  и с их помощью подавлять развитие болезнетворных микробов.

Препараты, содержащие бактерии (эубиотики  или пробиотики): колибактерин, лактобактерин, бифидумбактерин, бификол, микрококкобактерин, линекс, бактисубтил и другие.

Препараты, содержащие бактериофаги: бактериофаг брюшнотифозный, бактериофаг  дизентерийный, бактериофаг сальмонеллезный, бактериофаг коли-протейный, бактериофаг стафилококковый, бактериофаг стрептококковый, бактериофаг пиоцианеус, бактериофаг синегнойный, бактериофаг клебсиеллезный, пиофаг комбинированный и другие.