Лекции

Лекция  № 5 Обзор вирусов  вызывающих болезни у птиц (2 часа)

(Ньюкаслская болезнь (НБ), Вирус инфекционного бронхита птиц (ИБ), Инфекционный ларинготрахеит птиц (ИЛТ), Болезнь Марека (БМ), Инфекционный бурсит кур (ИББ), Синдром снижения яйценоскости (ССЯ – 76)) 

Вирус Ньюкаслской болезни (НБ, псевдочумы птиц)

- международное название возбудителя  Newcastle disease paramyxovirus.

Вирус является типичным представителем семейства  парамиксовирусов, РНК-содержащий. Вызывает высококонтагиозную вирусную инфекцию, главным образом, куриных (кур и индеек), характеризующуюся пневмонией, энцефалитом, множественными точечными кровоизлияниями и поражением внутренних органов. В литературе описаны случаи заражения людей НБ при нарушении гигиены на предприятиях (у больных развивается конъюнктивит).

     Заболевание зарегистрировано на всех континентах и относится к особо опасным инфекциям. Впервые его диагностировал (выделен вирус) и описал Краневельд на о. Ява в 1927 году. Свойства вируса более подробно изучены Дойлом в 1940 г.

    Источником инфекции является  больная птица. Заражение, как  правило, при контакте, особенно  аэрогенно, через инфицированную  воду и пищевые отходы. Вирус  локализуется в паренхиматозных органах, костном и головном мозге, мышцах, трахеальной слизи, толстом и тонком кишечнике. В период выраженной клиники вирус выделяется во внешнюю среду с фекалиями, трахеальной слизью. Переболевшие птицы остаются долго вирусоносителями. Выделить вирус можно только в начале болезни. В сыворотке птиц антитела появляются через 6 – 10 дн. после заражения, пока проявляются клинические признаки болезни, через 3 – 4 мес – снижение титра, через 8 – 12 месяца антитела уже не выявляются.

     Описано четыре формы клинического проявления НБ:

1 –  велогенная форма; характеризуется угнетением, слабостью, расстройство функции органов дыхания, диарея (фекалии водянистые зеленоватые с кровью), мышечный тремор.

Возможны  параличи лап, крыльев. Возможна гибель птицы без признаков. Смертность 90%. При вскрытии – основной признак  – геморрагическое поражение пищеварительного тракта.

2 –  характеризуется поражением органов  дыхания (кашель, удушье) и нервной  системы. Смертность 10 – 50% заболевших  птиц. Среди цыплят гибель достигает  90%.

3 –  проявляется в виде острого  респираторного заболевания у взрослых кур и иногда летального нервного заболевания у молодняка. Старая птица погибает редко. Некоторые мезогенные штаммы, вызывающие такую форму болезни, до сих пор используются в качестве вакцинных.

4 –  наиболее легкая форма, характеризуется  снижением аппетита легкий кашель ночью, яйценоскость прекращается на 7 – 22 день. У больных наблюдают незначительные изменения респираторного и герминативного тракта (оофориты и сальпингиты).

    При вскрытии птицы с ярко  выраженной клиникой обнаруживают  воспаление слизистых оболочек носа, гортани, трахеи и ротовой полости, полосчатые кровоизлияния на слизистой пищевода, в зобе – слежавшиеся кормовые массы.

     На границе железистого и мышечного  отдела желудка кровоизлияния  в виде «пояска». Тонкий кишечник  с очагами некроза и эрозии вокруг пейеровых бляшек, в толстом – везикулярные папулы, эрозии на всей слизистой. Селезенка поражаются часто – увеличена, бледная, пятнистая. Яичники гиперемированы. В сердечной мышце кровоизлияния, экссудат в полости сердечной сорочки. В головном и спинном мозге явления отека и гиперемии.

Устойчивость вируса. Инфекционность, гемагглютинирующая активность и иммуногенность вируса разрушаются при 56 С в течение от 5 минут до 6 часов. К низкой температуре вирус устойчив, в замороженном состоянии сохраняется более 2 лет. Ультразвук, растворы формалина (1-2 %), едкого натра (1-2 %), фенола (3-4 %) убивают вирус. К действию антибиотиков  вирус устойчив.

Гемагглютинирующие  свойства. Вирус способен агглютинировать эритроциты птиц, человека, мышей, морских свинок. Для отдельных штаммов вируса НБ характерна определенная температура, при которой они утрачивают ГА активность. Это свойство можно использовать для дифференциации штаммов.

Антигенная  вариабельность. Большинство полевых  вакцинных штаммов вируса НБ сходны в иммунобиологическом и антигеном отношении. Антигенный анализ с помощью РН позволил сгруппировать все вирусы в 5 антигенных подтипов. Штаммы вирусов различаются также по размеру бляшек и авидности, гемагглютинирующей и нейраминидазной активности, вызывают разные по характеру заболевания у птицы. Вирулентность полевых штаммов сильно варьирует и некоторые из них (природноослабленные) используют в качестве живых вакцин.

     Некоторые велогенные штаммы  вируса не утратили своего  эпизоотологического значения и преодолевают поствакцинальный иммунитет.

Диагностика

     При характерном течении болезни постановка диагноза не представляет сложности. При вспышке болезни на фоне пассивного или поствакцинального иммунитета поставить диагноз бывает трудно. Решающее значение в диагностике НБ имеют эпизоотологическая ситуация, клиническая и патологоанатомическая картина, а также лабораторные исследования, которые включают:

выделение вируса на КЭ, его индикация и  идентификация в РГА – РТГА с заведомо известными сыворотками, определение вирулентности вируса на КЭ и цыплятах, а также выявление АТ в парных сыворотках переболевших или вакцинированных птиц в РТГА.

     Вирус, в зависимости от его тропизма можно выделить из головного и костного мозга, трахеи, кишечника, селезенки, легких, печени, и, как правило, только в период вспышки болезни в первые 3-5 дней (через 15 дней уже не удается его выделить) и направлять в лабораторию в термосе со льдом. Внутренние органы можно консервировать глицерином, суспензию органов, смывов с трахеей исследуют в РГА. Это позволит выявить специфический антиген (вирус) с гемагглютинирующими свойствами в течение 3 – 5 часов и определить направленность дальнейших исследований.

     НБ следует дифференцировать  от инфекционного бронхита, ларинготрахеита, гриппа птиц, микоплазмоза, особое внимание уделяя при этом  на эпизоотологический мониторинг, исследование парных сывороток и периодический лабораторный анализ патматериала.

Иммунитет и специфическая профилактика. Продолжительность и напряжённость иммунитета у переболевшей или вакцинированной птицы зависит от биологических свойств вируса, возраста птицы и метода введения вируса в организм.

     Для спецпрофилактики существуют  инактивированные (гидроокисьалюминиевая  эмбрионформолвакцина) и живые (из штаммов Н, La Sota, F) вакцины

Вирус инфекционного бронхита птиц (ИБ)

– международное  название возбудителя Avian infectious bronchitis coronavirus (ABV coronavirus).

Отнесен к семейству коронавирусов. Это  первый в литературе коронавирус, в геноме которого полностью определена последовательность нуклеотидов. Впервые выделен в США в 1936 году (Бич и Шалк). Вирус РНК – содержащий диаметр вириона 80 – 100 нм.

    Вирус вызывает высококонтагиозную  болезнь, проявляющуюся у цыплят респираторным и уремическим (нефрозно–нефритным) синдромами, у кур - поражением герминативных органов (репродуктивный синдром), что ведет к длительному снижению яйценоскости. Болезнь встречается во всех странах с промышленным птицеводством.

Клинические симптомы и патологоанатомические изменения при ИБ

     Респираторный синдром проявляется у молодняка и характеризуется кашлем, трахеальными хрипами, носовыми истечениями, затрудненным дыханием (клюв открыт), конъюнктивитом, ринитом, синуситом. Высокая летальность у цыплят у одного месячного возраста, у 2 – 3 мес – в пределах 10 – 35%, у более старших – хроническое течение болезни в ассоциации с колибактериозом и микоплазмозом. При патвскрытии – серозный, катаральный или казеозный экссудат в трахее, бронхах.

    Нефрозно – нефритный синдром характерен тем, что некоторые штаммы вируса в течение двух первых недель локализуются и поражают почки и мочеточники с отложением уратов. Течение болезни острое (летальность 50 – 70%),  у больных - диарея с примесью уратов. При патвскрытии набухание почек и пестрота рисунка, микроскопические изменения варьируют от  нефрита до некротического нефроза.

    Репродуктивный синдром регистрируют у кур старше 6 месяцев; протекает бессимптомно, единственное проявление болезни – длительное снижение яйценоскости на 30 – 80% (яйца мелкие, неправильной формы с тонкой скорлупой). При вскрытии кур, переболевших ИБ в раннем возрасте, наблюдают инфантильное состояние всего яйцевода, недоразвитость яйцевых фолликул. В крупных птицехозяйствах ИБ имеет стационарный характер и протекает как хроническая инфекция, без ярко выраженных симптомов или в ассоциации с другими болезнями. Острое течение ИБ характеризуется контагиозностью, массовой заболеваемостью, респираторными признаками снижением продуктивности с появлением мелких деформированных яиц.

Устойчивость  вируса. В трупах павшей птицы вирус быстро теряет инфекционную активность, в пораженных тканях в 50% р–ре глицерина при температуре 4ºС сохраняется до 80 дней, в аллантоисной жидкости при 37ºС - три дня, при 20 – 30С - 24 дня. При минусовой температуре (-30ºС) активен в течение 17 лет. Высокие температуры 56ºС инактивируют вирус за 10 мин. УФЛ лучи – 18 – 20 часов, дезосредства (1% фенол, 70% спирт) – 3 мин.

Антигенная  вариабельность. Специфические антитела к вирусу ИБ у птицы образуются медленнее, чем при других инфекциях (вирус нейтрализующие через 2-3 недели после заражения, преципитирующие  - через 2 – 7 недель).

     Многие авторы свидетельствуют об антигенной и иммунологической вариабельности полевых штаммов вируса ИБ, выделенных в разных странах: Массачусетс, Коннектикут, Айова, Грей и т.д. Установлена антигенная близость некоторых штаммов вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней и штамма Массачусетс инфекционного бронхита кур в РН, РСК и РИД.

Гемагглютинирующие  свойства вируса изучены недостаточно.

Культивирование вируса ИБ удается в КЭ, 10 – 25 дневных цыплятах и хуже – в КК почек КЭ.

Диагноз на ИБ ставят, учитывая клинико-эпизоотологические данные болезни, патологоанатомические изменения, и, окончательно – по данным  лабораторных исследований (выделение и идентификация вируса) и ретроспективно (обнаружение специфических антител у переболевших птиц). Методом экспресс – диагностики ИБ является исследование аллантоисной жидкости зараженных КЭ в ПЦР. 

     Для выделения вируса из патматериала от трупов берут кусочки легких, соскобы трахеи и гортани, от взрослой птицы почки, яйцеводы, яйцо и заражают 8-10 дневные КЭ. Характерные признаки  поражения ИБ – гибель на 2 – 8 день, замедление роста, увеличение количества экстраэмбриональной жидкости. Зародыши мумифицированы с перекручиванием шеи, приминанием лапок к голове, шарообразной формы уплотненной консистенции, желток обычно сморщен, поражены почки и повышено содержание уратов, ХАО отечны – «эффект карликовости» (патогномотичный признак, имеющий диагностическое значение).

     Идентификацию выделенного вируса проводят при помощи РН и РЗГА (типоспецифические реакции и используются для определения серотипа вируса), РДП (идентификация вируса без выявления типовой принадлежности), РИФ (свечение в клетках КЭ обнаруживается уже через 5 – 25 часов после заражения).

     Ретроспективная диагностика ИБ основана на  обнаружении специфических антител у переболевших птиц в РН, РП в агаровом геле, РНГА. РНГА можно выявить более ранний (с 2 – 14 дня после заражения) иммунологический ответ цыплят, инфицированных вирусом ИБ (применяется в России 1978 года с фабричными диагностикумами).

     Как для серодиагностики, так и для ретроспективной диагностики при ИБ птиц вместо сыворотки крови можно использовать желтки яиц. Желтки для этого смешивают 1:1 с фосфатным буфером и добавляют равный объем хлороформа. Отстаивают 1 час центрифугируют, нагревают на водяной бане 56ºС 30 мин и полученный супернатант используют вместо сыворотки крови.

Иммунитет и специфическая  профилактика. Переболевшая птица резистентна к заражению гомологичным штаммом вируса. Высокий уровень антител регистрируется после заражения с третьей недели в течение года. В резистентности птицы при данной инфекции важную роль играет местный тканевой иммунитет респираторного тракта. Цыплята, вакцинированные аэрозольно живым вирусом, резистентны, даже если в сыворотке крови нет специфических антител.