Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья, обладающее противоопухолевой активностью

Гуминовые кислоты могут использоваться как стимуляторы роста растений и антисептики при лечении кожных болезней сельскохозяйственных животных [23].

В составе чаги найдены 15 амининокислот, среди которых преобладающими были: глицин, аспарагиновая и глютаминовая кислоты (40 % от суммы всех кислот), а также тирозин, серин, треонин, лейцин, метионин, лизин, гистидин [24].

Глицин активно участвует в обеспечении кислородом процесса образования новых клеток. Является важным участником выработки гормонов, ответственных за усиление иммунной системы.

Эта аминокислота является исходным веществом для синтеза других аминокислот, а также донором аминогруппы при синтезе гемоглобина и других веществ. Глицин очень важен для создания соединительных тканей.

Глютаминовая кислота служит важным источником аминогруппы в метаболических процессах. Глютаминовая кислота способна присоединять аммиак, превращаясь в глютамин, и переносить его в печень, где затем образуется мочевина и глюкоза, который важен для нормализации уровня сахара, повышении работоспособности мозга, при лечении алкоголизма, помогает бороться с усталостью, мозговыми расстройствами - эпилепсией, шизофренией и просто заторможенностью, при лечении язвы желудка, и формирование здорового пищеварительного тракта.

Аспарагиновая кислота способствует превращению углеводов в глюкозу и последующему запасанию гликогена. Аспарагиновая кислота служит донором аммиака в цикле мочевины, протекающем в печени. Повышенное потребление этого вещества в фазе восстановления нормализует содержание аммиака в организме. Аспарагиновая кислота может встречаться во фруктовых соках и овощах.

Тирозин необходим для нормальной работы надпочечников, щитовидной железы и гипофиза, создания красных и белых кровяных телец. Синтез меланина, пигмента кожи и волос, также требует присутствия тирозина. Тирозин обладает мощными стимулирующими свойствами.

Треонин обладает липотрофными свойствами. Он необходим для синтеза иммуноглобулинов и антител. Важная составляющая коллагена, эластина и протеина эмали; участвует в борьбе с отложением жира в печени; поддерживает более ровную работу пищеварительного и кишечного трактов; принимает общее участие в процессах метаболизма и усвоения. Регулирует передачу нервных импульсов нейромедиаторами в мозгу и помогает бороться с депрессией.

Гистидин почти на 60 % всасывается через кишечник. Он играет важную роль в метаболизме белков, в синтезе гемоглобина, красных и белых кровяных телец, является одним из важнейших регуляторов свертывания крови. В большом количестве содержится в гемоглобине. Гистидин легче других аминокислот выделяется с мочой. Поскольку он связывает цинк, большие дозы его могут привести к дефициту этого металла.

Лейцин необходимой для построения и развития мышечной ткани, синтеза протеина организмом, для укрепления иммунной системы. Понижает содержание сахара в крови и способствует быстрейшему заживлению ран и костей.

Лизин обеспечивает должное усвоение кальция; участвует в образовании коллагена (из которого затем формируются хрящи и соединительные ткани); активно участвует в выработке антител, гормонов и ферментов. Лизин служит в организме исходным веществом для синтеза карнитина.

Метионин является основным поставщиком сульфура, который предотвращает расстройства в формировании волос, кожи и ногтей; способствует понижению уровня холестерина, усиливая выработку лецитина печенью; понижает уровень жиров в печени, защищает почки; участвует в выводе тяжелых металлов из организма; регулирует образование аммиака и очищает от него мочу, что понижает нагрузку на мочевой пузырь; воздействует на луковицы волос и поддерживает рост волос. Так же важное пищевое соединение, действующее против старения, так как оно участвует в образовании нуклеиновой кислоты - регенерирующей составной части белков коллагена. Чрезмерное потребление метионина приводит к ускоренной потере кальция.

Серин участвует в запасании печенью и мышцами гликогена; активно участвует в усилении иммунной системы, обеспечивая ее антителами; формирует жировые «чехлы» вокруг нервных волокон.

Серин может быть синтезирован в организме из треонина. Он также образуется из глицина в почках. Серин играет важную роль в энергоснабжении организма. Кроме того, он является компонентом ацетилхолина [24].

 

В) Витамины

– сложные биологически активные, низкомолекулярные органические соединения, имеющие различное химическое строение. Они необходимы для нормального течения процессов обмена веществ. Большинство из них входит в состав ферментов, являясь их коферментами.

Витамины в организме не синтезируются или некоторые синтезируются, но в недостаточном количестве. Отсутствие витаминов или недостаток их в организме приводит к развитию различных заболеваний – гипо- или авитаминозам. Источниками витаминов служат в развитию различных заболеваний – гипо- или авитаминозам. Источниками витаминов служат в основном пищевые продукты, растения, а также продукты животного происхождения [24].

Витамины классифицируются по растворимости на жиро- и водорастворимые витамины. К жирорастворимым витаминам относятся витамины: A, D, E, K, Q, F; к водорастворимым: B1, B2, B3, B4, B5, B6, B8, B12, B15, BC, C, P, H, U.

В состав чаги входит витамин В1 (Рис. 5) (тиамин, 4-метил-5b-оксиэтил-N-2\-метил-4\-амино-5\-метилпиримидин-тиазолий).

 

Рис. 5 – Витамин В1

 

Тиамин существует обычно в виде солей, одна из которых – тиаминхлорид (С12Н17ОN4SCl·HCl; M=337,27 г/моль, кристаллизуется с ½ Н2О в виде бесцветных моноклинических игл с Тплав=233-244 °С и 250-252 °С). Известны также тиаминбромид (С12Н17ОN4SBr·HBr·1/2Н2О; М=435,19 г/моль; Тплав=220 °С и 229–231 °С) и тиаминмононитрат (С12Н17ОN4SNO3; М=327,37 г/моль; Тплав=164–165 °С и 196–200 °С).

Соли тиамина хорошо растворимы в воде, хуже в спирте, не растворимы в эфире, хлороформе, бензоле и ацетоне.

Биологическое значение тиамина обусловлено действием его производного – тиаминдифосфата, образующего из тиамина и АТФ при участии фермента тиаминазы. Тиаминдифосфат является коферментом ряда ферментов, играющих существенную роль в углеводном обмене – пируватдегидрогеназы, a-кетоглуторатдегидрогеназы, транскетолазы и дегидрогеназ кетокислот с разветвленной боковой цепью. Тиамин в виде ТДФ принимает непосредственное участие в осуществлении каталитического акта благодаря своей способности диссоциировать с отщеплением протона при втором углеродном атоме тиазолового кольца, после чего тиамин приобретает структуру высокоактивного биполярного иона, который взаимодействует с молекулой превращаемого субстрата [26].

Недостаток тиамина в организме человека и животных ведет к нарушению окисления углеводов, торможению зависящих от тиаминдифосфата процессов энергетического и пластического обеспечения жизненных функций, накоплению в крови и тканях недоокисленных продуктов обмена веществ, что, в свою очередь, приводит к патофизиологическим и патоморфологическим изменениям, создающим картину гиповитаминоза В1, одной из форм которого является бери-бери.

При недостатке тиамина наиболее значительные патологические изменения развиваются в пищеварительной, нервной и сердечно-сосудистой системах. Характерными проявлениями гиповитаминоза В1 является общая слабость, потеря веса тела вплоть до кахексии.

Тиамин широко распространен в живой природе. Он присутствует в микроорганизмах, растениях и всех тканях животного организма. В организме человека и высших животных тиамин не синтезируется, поэтому они должны получать его с пищей. Потребность человека в тиамине составляет 0,6 мг на 1000 ккал суточного рациона или 1,5 до 2,4 мг в сутки в зависимости от энергетических затрат [26].

 

Г)Флавоноиды

Флавоноиды представлены многочисленной группой природных биологически активных соединений – производных бензо-γ-пирона, в основе которых лежит фенилпропановый скелет, состоящий из С6-С3-С6 –углеродных единиц (Рис. 6):

 

 

 

Рис. 6 – Схема строения молекулы флавоноидов

 

Под термином флавоноиды объединены различные соединения, генетически связанные друг с другом и обладающие различными фармакологическим действием.

Свое название они получили от латинского слова «flavus» – желтый, поскольку первый выделенный из растений флавоноиды имели желтую окраску. Флавоноиды широко распространены в высших растениях, значительно реже встречаются в микроорганизмах и насекомых.

Около 40 % флавоноидов приходится на группу производных флавонола, несколько меньше группа производных флавона, значительно реже встречаются флаваноны, халконы, ауроны [15].

В группу флавоноидов входят многие красящие вещества, такие, как антоцианы, придающие тканям растений красную, розовую, синюю и фиолетовую окраски, флавонолы, халконы и ауроны, являющиеся носителями желтой и оранжевой окраски. Встречаются флавоноиды в цветах, плодах, корнях, семенах и древесине [27].

Флавоны – довольно нестабильные вещества, часто встречаются в растениях. Они способны образовывать С-гликозиды. Достаточно часто встречаются только два флавона: апигенин и лютеолин [28].

Флавонолы широко распространены в растительном мире. Наиболее известны из них кемпферол (3,5,7,41 - тетраоксипроизводное), встречающийся во многих растениях в форме гликозида, кверцитин (3,5,7,31,41- пентаоксипроизводное), изорамнетин, мирицетин (3,5,7,31,41,71- гексаоксипроизводное), кверцетагетин и госсипетин (3,5,7,8,31,41- гептаоксипроизводное) [28]. Это самые окисленные соединения в ряду флавоноидов. Они отличаются от флавонов наличием гидроксильной группы при третьем атоме углерода [28]. Флавонолы нестабильны в присутсвии кислорода [29], способны образовывать полигидроксилированные и полиметоксилированные соединения. Флавонолы окрашены в светло-желтый или желтый цвет.

Изофлавоноиды образуются в связи с перемещением фенильной группы от углеродного атома С2 к С3 флавоноидной циклической системы. Большинство известных изофлавоноидов относятся к изофлавонам, но встречаются представители других классов. Биофлавоноиды образуются в результате реакций конденсации, в которые могут вступать многие мономерные флавоноиды [30].

Халконы являются мало изученной группой флавоноидов. В растениях присутствуют исключительно в виде гликозидов.

Наиболее известным представителем является флоридзин (флоретин-2\-глюкозид), найденный в различных видах Malus, где он содержится в коре корней, листьях, молодых побегах и семенах [30].

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Материал и методики исследования

Объектом для исследования был взят березовый гриб (чага) – стерильная форма фитопатогенного гриба трутовика скошенного семейства гименохеновых грибов. Для анализа сырья (березового гриба - чаги) необходимо ввести показатели по которым можно судить о качестве сырья: влажность, зольность, экстрактивные вещества и хромогенный комплекс. Определение фармакопейных показателей проводили согласно методики ФС 42-53-72 [28].

Определение фармакопейных показателей:

ФС 42-53-72

1. Качество сырья определяется размерами средней части нароста.
2. Получение водного извлечения
3. Подкисление концентрированной хлористоводородной кислотой
4. Выпадение хромогенного комплекса в осадок
5. Определение разницы в массе сухих остатков водного извлечения и фильтрата (не менее 50%)
6. Числовые показатели:

• экстрактивных веществ не менее 20%,

• хромогенного комплекса — не менее 50% от массы общего сухого остатка.

 

Количественное определение

Методика

Аналитическую    пробу    сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром  2  мм.  10  г  измельченного  сырья  помещают  в  колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 300 мл воды и оставляют на 1 ч при комнатной   температуре.   Затем   колбу   соединяют   с  обратным холодильником  и  кипятят  на  электрической  плитке,  поддерживая слабое  кипение,  в  течение  2  ч.  После этого водное извлечение фильтруют через бумажный фильтр в мерную  колбу  вместимостью  500  мл,  сырье  переносят  на фильтр и промывают теплой водой.  Водное извлечение в колбе охлаждают до температуры 18-20 град. С, доводят объем извлечения водой до метки и тщательно перемешивают. 25 мл фильтрата  переносят  во  взвешенную  фарфоровую  чашку, выпаривают  на водяной бане досуха и сушат при температуре 100-105 град.  С в течение 3 ч,  затем охлаждают  в  эксикаторе  и  быстро взвешивают, определяя массу сухого остатка (m1).

Для определения  хромогенного  комплекса  100   мл   фильтрата помещают  в стакан вместимостью 150 мл,  подкисляют 25%  раствором хлористоводородной  кислоты  (0,5-0,8  мл)  до  рН  1,0-  2,0   по универсальной индикаторной бумаге,  перемешивают и оставляют на 30мин.  После выпадения темно -  бурого  осадка  содержимое  стакана фильтруют через бумажный складчатый фильтр.

25 мл  фильтрата,  полученного  после  осаждения  хромогенного комплекса  хлористоводородной кислотой,  переносят в высушенную до постоянной массы и  взвешенную  фарфоровую  чашку,  выпаривают  на водяной  бане  досуха  и  сушат при температуре 100-105 град. в течение 3 ч,  затем охлаждают в эксикаторе  и  быстро  взвешивают, определяя массу сухого остатка без хромогенного комплекса (m2).

       Содержание хромогенного  комплекса в процентах (X) в пересчете  на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

 

                        (m1 - m2) х 500 х 100 х 100

                   Х = -----------------------------,

                            m х 25 х (100 - W)