Содержание

     Введение 3

     1 Обзор литературы 4

     1.1 Нормальная микрофлора ЖКТ детей и взрослых 4

     1.2 Характеристика молочнокислых бактерий и бифидобактерий 8

     1.2.1 Бифидобактерии 8

     1.2.2 Лактобациллы 11

     2 Объекты и методы исследовании 16

     2.1 Объекты исследования 16

     2.2 Методы исследования 19

     2.2.1 Метод определения редуктазы с резазурином 19

     2.2.2 Определение общего количества бактерий (ГОСТ 9225-84) 21

     2.2.3 Определение бактерий группы кишечных палочек (БГКП) 22

     2.2.4 Метод микрокопирования 23

     2.2.5 Определение количества клеток ацидофильных бактерий 23

     2.2.6 Метод определения массовой доли жира, % по ГОСТ 58-67-69 24

     2.2.7 Метод определения кислотности 24

     2.2.8 Метод определения бифидобактерий 24

     Заключение 26

     Список использованных источников 27 

 

     

     Введение

 

     Организм  ребенка грудного возраста отличается высокой лабильностью многих жизненно важных систем и предрасположенностью к развитию патологических состояний  различного типа.

     В постнатальном периоде, в процессе адаптации к внеутробным условиям существования желудочно-кишечный тракт и его микрофлора в процессе завершающего формирования отличаются как высокой вариабельностью, так  и наличием, практически у всех новорожденных детей, явлений транзиторного  дисбактериоза.

     Кисломолочные продукты давно с успехом используются для лечения детей с дисбактериозами, так как в результате брожения получаемый продукт приобретает  способность ингибировать патогенную микрофлору, улучшать всасывание микроэлементов, улучшать переваривание и усвоение питательных веществ. Так протеолитическая и липолитическая активность кисломолочных  продуктов изменяет жиры и белки, что повышает их всасывание, снижает  вероятность аллергических реакций. Кроме того, данная группа продуктов  имеет пониженное содержание лактозы.

     Изучение  микробиологии кисломолочных продуктов  необходимо для улучшения процесса их производства и контроля.

 

                                                       

     1 Обзор литературы

1. Нормальная  микрофлора ЖКТ детей  и взрослых

 

     Интересную  гипотезу о тонких механизмах формирования микрофлоры тела сформулировал Б.А.Шендеров в 1998 г. По его мнению, подразделение  микроорганизмов на «свои» и «чужие»  начинается еще в утробе матери. В организм плода через кровь  попадают молекулы-антигены бактерий, входящих в состав нормальной микрофлоры различных участков тела матери. Известно, что взрослый организм, как правило, не способен формировать иммунный ответ  на те антигены, с которыми сталкивался  в период внутриутробного развития. Это явление называют «иммунологическая  толерантность». После рождения организм новорожденного не будет стараться  защититься от материнских микроорганизмов, и они станут основой для формирования его собственной микрофлоры .[1]

     К настоящему времени выявлены некоторые  общие закономерности заселения  желудочно-кишечного тракта человека микроорганизмами. Установлено, что  в первые часы и дни в кишечнике  новорожденных встречаются преимущественно  микрококки, стафилококки, энтерококки  и клостридии. Затем появляются энтеробактерии (кишечные палочки), лактобациллы и  бифидобактерии. Первые микроорганизмы, обнаруживаемые у новорожденных, не обязательно те, которые доминируют в фекальной и вагинальной  флоре матери. Со временем в кишечнике  появляются, а затем начинают преобладать  неспороносные облигатно-анаэробные бактерии (бифидобактерии, эубактерии, бактероиды, стрептококки, спириллы и  др.). Для того чтобы микробная  экология пищеварительного тракта новорожденных  приблизилась к таковой взрослых требуется несколько лет. [2]

     Особенно  обильна микрофлора нижних отделов  пищеварительного тракта, где содержание бактерий достигает 10¹²ˉ¹³ КОЕ на 1г содержимого (разные авторы называют различный суммарный вес микроорганизмов  в кишечнике взрослого человека: от 1 до 3 кг ). Здесь обнаружены представители  более 500 видов бактерий. Число анаэробных микроорганизмов в этой области  здорового взрослого человека в 100-1000 раз выше, чем аэробных бактерий. Такие представители микрофлоры, как энтеробактерии, включая кишечные палочки, стафилококки, грибы и другие аэробы, составляют немногим более 1-4% и рассматриваются как добавочная или случайная микрофлора. [1]

     Представители нормальной микрофлоры присутствуют в  организме человека и животных в  виде фиксированных к определенным рецепторам микроколоний, заключенных  в биопленку. [2]

       Биопленка как перчатка покрывает  кожу и слизистые открытых  окружающей среде полостей здорового  человека и животных и состоит  помимо микроколоний микроорганизмов  из экзополисахаридов различного  состава микробного происхождения,  а также муцина, продуцируемого  бокаловидными клетками слизистых.  С функциональной точки зрения, биопленку можно сравнить с  плацентой. Если последняя регулирует  взаимоотношения плода и организма  матери, то биопленка регулирует  взаимоотношения между макроорганизмом  и окружающей средой. Благодаря  наличию в биопленке сложной  и разветвленной системы кооперации  между многочисленными и разнообразными  микробными популяциями, попадающий  в организм естественным путем  исходный субстрат в результате  микробной трансформации превращается  через каскад реакций в промежуточный  либо конечный продукт с той  или иной биологической или  фармакологической активностью.  Установлено, что нормальная микрофлора  и продукты ее метаболической  активности участвуют в регуляции  газового состава кишечника и  других полостей организма хозяина,  в метаболизме белков, углеводов,  липидов и нуклеиовых кислот, в водно-солевом обмене, в обеспечении колонизационной резистентности, в рециркуляции стероидных соединений и других макромолекул, в детоксикации экзогенных и эндогенных субстратов, обладают морфокинетическим действием, выполняют иммуногенную и мутагенную/антимутагенную функцию, служат источником энергии для клеток хозяина, являются хранилищем и источником генетического материала. [2]

     Таким образом, Б.А.Шендеров рассматривает  биопленку с входящими в нее  многочисленными и разнообразными микроорганизмами, как первичную  мишень любого попадающего обычным (непарентеральным) путем соединения, как структуру, первой вовлекаемой  в процессы распознавания, метаболизации, абсорбции и транслокации как  полезных ,так и потенциально вредных  агентов. Нормальная микрофлора – тот  первичный неспецифичный барьер, лишь после прорыва которого инициируется включение всех последующих неспецифических  и специфических иммунных и биохимических  механизмов защиты макроорганизма. [1]

     Для обозначения состояний характеризующихся  нарушениями состава нормальной микрофлоры используют такие термины  как «дисбактериоз», «дисбиоз», «микробиологический  дисбаланс» и т.д.

     Прежде  всего необходимо отметить, что дисбактериоз – это не самостоятельное заболевание, а особое состояние организма, встречающееся  у больных с самыми разными  диагнозами (от нарушений гормонального  обмена до кариеса). [3]

     В большинстве случаев дисбиотические изменения исчезают вскоре после  устранения вызвавшего их фактора и  не требуют лечения. Однако у ослабленных  больных (особая категория – дети), а также в случаях продолжения  действия фактора, послужившего причиной развития дисбиоза, самовосстановления не происходит, появляются клинические  симптомы, что требует проведения адекватного лечения. Состав микрофлоры отдельных индивидуумов может варьировать  в достаточно широких пределах. При  этом у детей, как и у взрослых, состав микрофлоры будет определяться характером питания. Поэтому с помощью правильного питания можно, в определенной степени, влиять на состав кишечной микрофлоры и нормализацию работы желудочно-кишечного тракта. [4]

     Механизмы положительного влияния молочнокислых  бактерий и бифидобактерий, содержащихся в кисломолочных продуктах, на организм ребенка следующие:

• Ингибирование роста потенциально вредных микроорганизмов в результате продукции антимикробных субстанций; конкуренции с ними за рецепторы адгезии и питательные вещества; активации иммунно-компетентных клеток и стимуляции иммунитета.
• Стимуляции роста представителей индигенной микрофлоры в результате продукции витаминов и других ростостимулирующих факторов; нормализации рН, еН-потенциала; нейтрализации токсинов.
• Восстановление и оптимизация функционирования биопленки, выстилающей слизистую пищеварительного тракта.
• Изменение микробного метаболизма, ведущего к повышению или снижению синтеза и активности бактериальных ферментов и, как следствие этого, продукции соответствующих метаболитов (например, ЛЖК, глютамина, аргинина, витаминов, пептидогликанов и т.д.), обладающих способностью местно или после проникновения в кровь и другие биологические жидкости макроорганизма непосредственно вмешиваться в метаболическую активность клеток соответствующих органов и тканей. Модулировать его морфокинетические характеристики, физиологические функции, биохимические и поведенческие реакции.
• Другие механизмы (прямые эффекты естественных пробиотиков (молочнокислых и бифидобактерий) после их всасывания из пищеварительного тракта на ферментативные и иные клеточные реакции гормональных, нервных, выделительных, иммунных и других органов и тканей). [2] 
  

     1.2 Характеристика молочнокислых  бактерий и бифидобактерий

     1.2.1 Бифидобактерии

 

     Бифидобактерии  составляют основу микрофлоры желудочно-кишечного  тракта человека. В настоящее время  род Bifidobacterium включает 32 вида .[2]

     В табл.1 приведены виды бифидобактерий, наиболее часто обнаруживаемые в  пищеварительном тракте.

Таблица 1 Виды бифидобактерий, наиболее часто обнаруживаемые в желудочно-кишечном тракте человека. [2]

 

     Впервые эти микроорганизмы были изолированы  из фекалий грудных детей учеником И.И. Мечникова французским исследователем Henry Tissier в 1899 году .[4]

     Эти грамположительные анаэробные, не образующие споры, палочковидные, полиморфные  бактерии, нередко с бифрукациями на концах, были названы им Bacillus bifidus communis. В последующем было установлено, что эти микроорганизмы  на 99% составляют флору кишечника здорового грудного ребёнка. И в больших количествах присутствуют в микробиоценозе толстого кишечника взрослых людей. [5]

     Основываясь на высокой частоте встречаемости  этих бактерий в пищеварительных  трактах . И.И. Мечников и  Henry Tissier ещё в 1905 году пытались применить препараты из бифидобактерий больным с кишечными дисфункциями. [4]

     Проведённая российскими исследователями статистическая обработка данных о видовом составе  бифидобактерий у различных возрастных групп населения России показала, что у здорового грудного ребёнка, находящегося на грудном вскармливании, B.Bifidum, B.longum, B.breve, B.infantis, встречаются в соотношении 35%, 42%, 17%, 12%. Штаммы  B.adolescentis обнаруживаются у 1.5% детей отсутствуют в фекальном содержимом. У детей на искусственном вскармливании содержание доминирующих видов бактерий падает до 3-5%, в то время как представители вида B. adolescentis, встречаются в 22% случаев.