Поверка гематологических анализаторов на примере анализаторов типа «Гемаскрин - 08»

Таким образом, кондуктометрический метод позволяет определять большинство эритроцитарных и тромбоцитарных показателей, связанных с объемом клеток, а также является основой для трехчленной дифференцировки лейкоцитов. В анализаторах последнего поколения вышеописанный метод объединен с использованием различных дифференцировочных лизатов, лазерного светорассеивания, радиочастотного анализа, иммуноцитохимического метода, что значительно расширяет возможности исследования и позволяет определять до 30 параметров крови, включая полный анализ лейкоцитарной формулы и подсчет ретикулоцитов. 

Для определения концентрации гемоглобина применяется спектрофотометрический метод. Все формы гемоглобина, содержащиеся в анализируемой крови переводятся в одну - гемиглобинцианид. Перевод гемоглобина в гемиглобинцианид осуществляется при его взаимодействии с трансформирующим раствором, содержащим феррицианид калия, цианид калия, дигидрофосфат калия и неионный детергент. Дигидрофосфат калия поддерживает уровень рН. Детергент усиливает гемолиз эритроцитов и предотвращает мутность, связанную с белками плазмы. Феррицианид калия окисляет все формы гемоглобина в метгемоглобин, который образует с цианистым калием гемиглобинцианид. Раствор гемиглобинцианида образует отчетливую полосу поглощения света в желто-зеленой области спектра с максимумом при 540-545 нм. Именно этот участок спектра используется для определения концентрации общего гемоглобина. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе.

Результаты автоматического гематологического анализа представлены в виде цифровых значений (абсолютных или относительных), а также графически – в виде гистограммы распределения клеток по объему. Гистограммы, предоставляющие дополнительную информацию, рекомендуется рассматривать параллельно с цифровыми значениями, они обязательно должны присутствовать на бланке исследования.

3.3 Основные показатели, определяемые  в ходе анализа крови с помощью  гематологического анализатора.

Общий анализ крови может быть сокращённым, содержащим показатели гемоглобина, лейкоцитов, скорость оседания эритроцитов, и развёрнутым, в котором указаны все элементы крови. Ниже приведены три основных показателя, определяемые с помощью гематологического анализатора в ходе общего анализа крови.

WBC (white blood cells) – количество  лейкоцитов крови (х109/л). Ошибки в подсчете числа лейкоцитов на автоматическом анализаторе возможны в сторону его повышения при наличии в крови нормобластов или устойчивых к лизису эритроцитов, агрегатов тромбоцитов, криоглобулинов или криофибриногена. В таких случаях в большинстве современных анализаторов появляются сообщения об ошибке («флаги»), распечатываемые на бланке анализа. Ложное занижение показателя возможно при длительном хранении крови (более 24 ч) или грубом перемешивании.

RBC (red blood cells) – количество  эритроцитов крови (х1012/л). Ложнозавышенные результаты наблюдаются при наличии в крови гигантских тромбоцитов, криоглобулинов. Ложное занижение результатов может быть следствием агглютинации эритроцитов (в том числе холодовой), повышения вязкости крови при ее охлаждении во время хранения или транспортировки, наличия микросгустков из-за плохого перемешивания с антикоагулянтом сразу после забора крови, выраженного микроцитоза эритроцитов. При параллельном подсчете эритроцитов в камере Горяева расхождение результатов может достигать 30% вследствие частичного гемолиза и неточного дозирования при разведении эритроцитов вручную, поэтому «перепроверять» количество эритроцитов рутинным методом нецелесообразно.

HGB (hemoglobin) - концентрация гемоглобина крови (в г/л или г/дл). Концентрация гемоглобина в большинстве гематологических анализаторов определяется спектрофотометрическим гемоглобинцианидным или другими методами. На результат может повлиять гиперлейкоцитоз (>50х109/л), а также повышенное содержание в крови нейтральных жиров (липемия), что связано с техническими возможностями прибора, а не с методологией измерения. Избежать влияния липемии можно при правильной подготовке пациента к анализу (диета накануне исследования, сдача крови натощак).

4 Описание гематологического анализатора «Гемаскрин - 08».

Анализаторы гематологические серии «Гемаскрин» (далее по тексту - анализаторы) предназначены для измерения следующих параметров крови:

• RBC - Концентрация эритроцитов;
• WBC - Концентрация лейкоцитов;
• HGB - Концентрация гемоглобина.

Внешний вид анализатора представлен на рисунке 1.

Рисунок 1. Внешний вид гематологического анализатора «Гемаскрин – 08»

Анализаторы также могут рассчитывать следующие параметры крови: гематокрит, средний объем эритроцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроцитах, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, ширина распределения эритроцитов по объему, ширина распределения эритроцитов по объему, число тромбоцитов, средний объем тромбоцитов, распределение тромбоцитов по объему, тромбокрит, коэффициент больших тромбоцитов, дифференцировка лейкоцитов на 3 субпопуляции в абсолютном и относительном отношении (лимфоциты, средние клетки, гранулоциты) или на 5 субпопуляций в абсолютном и относительном отношении (лимфоциты, средние клетки, базофилы, нейтрофилы и эозинофилы).

Принцип действия анализаторов основан на двух методах измерения, описанных выше:

кондуктометрический метод для подсчета количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, основанный на изменении сопротивления раствора между электродами при прохождении клетки крови через апертуру фиксированного диаметра и спектрофотометрический метод для определения концентрации гемоглобина, основанный на поглощении измеряемым раствором излучения с длиной волны 540 нм.

Конструкция анализатора включает в себя следующие блоки и узлы:

Основной   блок,   предназначенный   для   проведения   анализа  образцов и включающий в себя блок измерительных камер для выполнения кондуктометрических и спектрофотометрических измерений.

Блок подачи образцов, предназначенный для автоматизации ввода образцов в основной блок.

Блок проточной цитометрии для дифференцировки лейкоцитов на 5 субпопуляций.

Блок обработки информации, предназначенный для обработки данных и управления основным блоком.

Узел гидравлической автоматики, предназначенный для дозирования и разведения образцов цельной крови необходимыми реагентами с целью обеспечения работы измерительных камер основного блока.

5 Поверка гематологического  анализатора «Гемаскрин - 08»

Гематологические анализаторы серии «Гемаскрин» прошли испытания в целях утверждения типа, признаны средством измерения и подлежат периодической поверке. Регистрационный номер средства измерения в Федеральном информационном фонде 54897-13.  Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «Хоспитекс Диагностикс», Россия.

Межповерочный интервал - 1 год.

Поверка проводилась в соответствии с методикой поверки МП 30.Д4-13.

При проведении поверки выполнялись операции, перечисленные в Таблице 1.

Таблица 1.

Номер пункта НД по поверке	Наименование операций
5.1	Внешний осмотр
5.2	Опробование анализатора
5.3	Проверка диапазона измерения WBC, RBC, HGB
5.4	Определение относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB

 

Средства поверки: ГСО 9624-2010 состава форменных элементов крови.

Условия поверки: температура воздуха 21,9º С, относительная влажность воздуха - 49%, атмосферное давление 758 мм.рт.ст. В помещении отсутствовали механические вибрации и посторонние источники излучения, а также мощные постоянные и переменные электрические магнитные поля.

Результаты поверки

5.1 Внешний осмотр

Проверку внешнего вида анализатора проводили путем визуального осмотра (фотографическое изображение соответствует образцу анализатора, представленного на поверку, отсутствуют механические повреждения), в протокол поверки заносили заводской номер и модель анализатора.

5.2 Опробование

5.2.1 Опробование анализаторов проводили путем включения анализатора в соответствии с указаниями, приведенными в руководстве пользователя на анализатор. После включения анализатора на дисплее появляется главное меню анализатора.

5.2.2 Идентификация программного обеспечения

Встроенное программное обеспечение размещается в энергонезависимой памяти процессоров аппаратной части анализатора, запись которой осуществляется в процессе производства. Доступ к нему исключён конструкцией аппаратной части анализаторов (установка интегральных схем пайкой, отсутствие внешних интерфейсов обновления программного обеспечения).

Идентификационные данные (признаки) метрологически значимой части программного обеспечения анализаторов соответствуют требованиям нормативно - технической документации.

5.3 Проверка диапазона измерения WBC, RBC, HGB

5.3.1 Проверку диапазона измерения WBC, RBC, HGB совмещали с операциями определения относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB.

5.3.2 Анализатор прошел поверку, т.к. диапазон измерения WBC, RBC, HGB соответствует следующим диапазонам: WBC (0 ÷ 119,9) х109 1/л; RBC (0 ÷ 14) х1012 1/л; HGB (0 ÷ 35) г/дл.

5.3.4 Определение относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB

Для определение относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB проводили 10 измерений параметров в ГСО 9624-2010 (патологический уровень) и 10 измерений параметров в ГСО 9624-2010 (нормальный уровень).

5.4.3 Рассчитывали средние арифметические значения параметров ГСО (Ссрj ) по формуле

,

где Сi- текущее значение измерения j-го параметра

5.4.4 Рассчитывали относительное среднее квадратичное отклонение измерения WBC, RBC, HGB в ГСО 9624-2010 S0j, %, по формуле

5.4.5 Анализатор выдержал поверку, так как полученные значения относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB не превышают 3,5% при измерении содержания WBC; 2,5% при измерении содержания RBC; 2,0% при измерении содержания HGB.

 

5.4.6 Оформление результатов поверки.

По результатам поверки анализатор признан пригодным к эксплуатации. Выдано свидетельство о поверке, оформленное в соответствии с правилами по метрологии ПР 50.2.006-94. Оформлен протокол поверки в соответствии с Приложением А к Методике поверки МП 30.Д4-13 «Анализаторы гематологические серии Гемаскрин» (протокол поверки приведен в п. 5.4.7 данной курсовой работы).

 

 

Федеральное бюджетное учреждение

«Государственный региональный центр стандартизации,

 метрологии и испытаний  в Кировской области»

610035, г. Киров, ул. Попова, д. 9

ПРОТОКОЛ № 63-49/6317-263

Периодической поверки от «25» февраля 2015г.

Средство измерений:	Анализатор гематологический серии Гемаскрин, мод. Гемаскрин-08
Заводской №		12409F
Принадлежащее				КОГБУЗ «Юрьянская ЦРБ», ИНН / КПП 4338001795 / 433801001
Поверено в соответствии с методикой поверки						МП 30.Д4-13 «Анализаторы гематологические серии Гемаскрин»
утвержденной ГЦИ СИ ФГУП «ВНИИОФИ» 13 мая 2013 г
С применением эталонов:			Стандартный образец состава форменных элементов крови ГСО 9624-2010
При следующих значениях влияющих факторов
Температура, ºС                                                    21,9
Влажность, %                                                        49
Атмосферное давление, мм. рт. ст.                     758
Получены результаты поверки метрологических характеристик:
Определение относительного среднего квадратичного отклонения измерения WBC, RBC, HGB, % Патология Норма   WBC, 109/л RBC, 1012/л HGB, г/л   WBC, 109/л RBC, 1012/л HGB, г/л Среднее 3,3 2,47 73 Среднее 6,9 4,14 123 СКО, % 1,01 1,22 0,74 СКО 2,25 1,24 0,94
Заключение:		Анализатор гематологический серии Гемаскрин, мод. Гемаскрин-08,
		зав. № 12409F пригоден к применению
Поверитель		Средство измерений признать пригодным (или непригодным) для применения   М.Ю. Урванцев (дата:   ______________)