Применение ПААГ-электрофореза для анализа белковых фракций, полученных из культуры Hansenula polymorpha NCYC 495ln

Автор работы: Пользователь скрыл имя, 20 Декабря 2011 в 20:50, курсовая работа

Описание работы

Целью настоящей работы является получение препарата АО из белковых фракций и применение ПААГ-электрофореза для её определения на различных стадиях выделения фермента из дрожжей Hansenula polymorpha NCYC 495ln методом электрофореза в полиакриламидном геле в нативных условиях.

Содержание работы

Введение………………………………………………………………………………………..2
2. Литературный обзор………………………………………………………………………3
2.1. Общие принципы электрофореза……………………………………………………..3
2.2. Электрофорез белков…………………………………………………………………..4
2.2.1. Поведение белков при электрофорезе………………………………………………4
ПААГ-электрофорез белков………………………………………………………...…7
Определение молекулярной массы белков…………………………………………...9
Окрашивание белков в ПААГ………………………………………………………..12
Кислые красители………………………………………………………………13
Другие красители и методы окрашивания……………………………………16
Алкогольоксидаза и её биохимические свойства……………………………………17
3.1. Роль АО в метилотрофном метаболизме дрожжей………………………………...17
4. Экспериментальная часть……………………………………………………………….18
4.1. Методика выращивания дрожжей Hansenula polymorpha NCYC 495ln ……………18
4.2. Методика выделения фермента………………………………………………………..20
4.3. Методика проведения электрофореза………………………………………………....22
4.3.1. Подготовка растворов……………………………………………………………23
4.3.2. Подготовка установки к работе………………………………………………….25
5. Обсуждение результатов………………………………………………………………….27
Выводы…………………………………………………………………………………………30
Список литературы…………………………………………………………………………..31